رسالة دكتوراه في كلية العلوم تناقش عزل و تنقية السموم القاتلة المنتجة بواسطة بعض السلالات الخميرية واختبار فعاليتها الضد بكتيرية و فطرية

ناقشت اطروحة دكتوراه في قسم لعلوم الحياة والتي بعنوان عزل و تنقية السموم القاتلة المنتجة بواسطة بعض السلالات الخميرية واختبار فعاليتها الضد بكتيرية و فطرية للطالبه نجوى محمد جميل علي وكان عدد فصولها 4 وتهدف الدراسة الى التعرف على التنوع الحيوي للخمائر من عينات التربة جلبت من مناطق متفرقة في محافظتي البصرة و ذي قار وتم خلال الدراسة الحصول31 نوع تعود لـ 19 جنس حيث كان   12 جنس يعود للفطريات الكيسية و 7 للفطريات البازيدية . واستخدمت طريقة التخفيف للعزل الاولي وكما استخدمت اوساط زرعية عامة و انتقائية ودعم .قيست الدالة الحامضية و الملوحة ودرست علاقتها في الحصول على العزلات المنتجة للأيض الثانوي وبشكل خاص السموم القاتلة .تبين من النتائج سيادة النوع Yarrowia lipolyticais بنسبة ظهور 20 % تلاه النوع Rhodotorula mucilignosa بنسبة 13.39% وكانت اقل الاجناس ظهور بنسبة 0.89% لـ 14 نوع .وتم الحصول على 270 عزلة خميرية نقية ,حيث شخصت تلك العزلات بالطرائق المظهرية التقليدية اذ استخدمت صبغة Diazonium blue B للتميز بين الخمائر الكيسية و البازيدية واظهرت كفاءة جيدة في التفريق الاولي بينهما . ووسط كروم اكار كانديدا .و112 عزلة شخصت بايوكيميائياً بالفايتك .و تقنية PCR . واعتمادا على التشخيص الجزيئي شخص 112 سلالة نمطية وسجلت (   11) سلالة جديدة في العراق و(18) نوع جديد في العراق. كما تم دراسة التعبير الجيني لثلاث جينات M1,M2,M28 في الفايروس الفطري المتعايش مع الخمائر واختبرت قابلية 31 سلالة نمطية على انتاج السموم الثلاثة فاعطت جميعها نتيجة ايجابية الا ان الفطرين Wickerhamomyces anomalusو Torulaspora delbrueckii اعطت اعلى مستوى للتعبير الجيني للفطريات الثلاثة.

اجري اختبار ومسح تمهيدي اولي ل 112 سلالة نمطية لاختبار قابليتها على انتاج السموم القاتلة وعلى اوساط زرعية و ظروف حضن مختلفة وتبين ان الفطرين Wickerhamomyces anomalusو Torulaspora delbrueckiiلهما اعلى قابلية في انتاج السموم القاتلة الخام واختبرت قابليتهما على تثبيط ثلاث سلالات نمطية سريرية اثنين من البكترياStaphylococcus aureus ,Escherichia coli و خميرة Candida albicans.واظهرت اعلى قطر تثبيط Wickerhamomyces anomalusوتليها Torulaspora delbrueckii. ثم نقي نوعين من السموم القاتلة WK,TK من راشح الوسط للسلالتين كلا على حدة بطريقة الترسيب بملح كبريتات الامونيوم بتركيز 40% و الديلزة للسم القاتل TK فقط لمدة 48 ساعة وطريقة الترشيح الهلامي باستخدام عمود فصل يحتوي على مادة السيفادكس LH 20 للسم القاتل WK وقد اظهر المركبين النقيين فاعلية تثبيطية تجاه الفطريات و البكتريا وكان WK بشكل عام اعلى تثبيط من TK وبتركيز 200 ملغم /مل حيث كان اعلى قطر التثبيط 35 ملم تجاه Candida albicans واقل قطر تثبيط 23 ملم تجاه Escherichia coli . كما تم تشخيص المركبين بطرائق طيف الاشعة فوق البنفسجية و تحت الحمراء واظهرت النتائج طبيعة المركبين البروتينية كما اظهر الترحيل العمودي للبروتينات الوزن الجزيئي للسم TK 45 كيلودالتون و WK 15 كيلودالتون. واجري اختبار السمية لـ WK,TK تجاه كريات الدم الحمراء ولم تظهر اي تاثير سمي عند التركيز 0.2غم / مل