مناقشة اطروحة دكتوراة بعنوان التعبير الجيني للانزيم البشرى Glucocerebrosidase في نبات دوار الشمس

نوقشت اطروحة دكتوراه في قسم علوم الحياة بعنوان "التعبير الجيني للانزيم البشرى glucocerebrosidase  في نبات دوار الشمس"

واوضحت طالبة الدكتوراه زينب طعمه خلف ان الدراسة تضمنت الدراسة انتاج انزيم glucocebrosidase المستخدم لعلاج المرض الوراثي Gaucher disease بطريقه الهندسه الوراثيه في خلايا نبات L. Helianthus annuus و باستخدام بكتيريا Agrobacterium fumefaciens LBA4044 تحت ظروف محليه مع دراسه التعبير الجيني لهذا الانزيم داخل الخلايا النباتيه ومقارنه التعبير الجيني الانزيم داخل جسم الانسان. تم استخلاص الحمض النووي الاوكسجيني RNA من عينه الدم البشري كذلك تم الحصول على الخيط الاول المفرد للحامض النووي الرايبوزي منقوص الاوكسجين المتمم cDNA بعمليه النسخ العكسي ضخم جينGBAI gene المسول عن انتاج انزيم glucocerebrosidase و باستخدام بادئات خاصه واوضحت النتائج تضخيم حزمه 1561 زوج قاعده ثم كلونة الجين المضخم في ناقل الكلونة المسمي pcambia 1304 وقد تم الحصول على ناقل كلونة يحمل الصفه الوراثيه لتشفير انزيم glucocerebrosidase المسمي pcambia 1304-GBA و بحجم 11353 زوج قاعدي. حول ناقل الكلونه الى نوعين من البكتيريا المهندسه وراثيا وهي Escherichia coli DH5α وAgrobacterium tumefacience LBA4404 .اكدت النتائج الحصول على بكتيريا A. fumefacience محور وراثيا حامله لناقل الكلونه الحاويه على GBA gene استخدمت هذه البكتيريا لتحويل نبات عباد الشمس الى نبات محور وراثيا حاوي على الجين البشري GBA gene الذي يشفر لانتاج انزيم glucocerbrosidase كما تم تشخيص وجود الجين البشري داخل الخلايا من خلال تضخيم الجين من الجينوم المعزول من الخلايا النباتيه المحوره بواسطه Real time كما قيس التعبير الجيني للانزيم بواسطه time PCR Real واوضحت النتائج هنالك فروق قليله او معدومه بين تعبير الجين داخل الخلايا النباتيه مقارنه التعبير الجيني داخل جسم الانسان .